Адгезия, активация и агрегация тромбоцитов

Тромбоциты играют критическую роль в гемостазе, образуя первичную пробку, которая первоначально герметизирует сосудистые дефекты, кроме того, они формируют поверхность, на которой происходят концентрация и связывание активированных факторов свертывания. Тромбоциты представляют собой фрагменты не содержащих ядер клеток в форме диска, которые образуются из мегакариоцитов костного мозга в кровоток. Их функция зависит от нескольких гликопротеиновых рецепторов, сократительного белка цитоскелета и двух типов цитоплазматических гранул:

• α-гранулы содержат адгезивную молекулу Р-селектина на своих мембранах и белки, участвующие в коагуляции, такие как фибриноген, фактор свертывания крови V и vWF, а также белковые факторы, которые могут участвовать в заживлении ран, такие как фибронектин, тромбоцитарный фактор 4 (гепарин-связывающий хемокин), PDGF и TGF-β.
• δ-гранулы (или плотные) содержат АДФ и АТФ, ионизированный кальций, серотонин и адреналин.

После травматического повреждения сосудов тромбоциты взаимодействуют с компонентами субэндотелиальной соединительной ткани, такими как vWF и коллаген. При контакте с этими белками тромбоциты подвергаются последовательным изменениям, кульминацией которых является формирование первичной гемостатической пробки из тромбоцитов (см. рис. 4.5, В).

Этап 1. Адгезия тромбоцитов опосредована в основном взаимодействием с vWF, который действует как мост между гликопротеиновым Ib-рецептором на поверхности тромбоцитов (Gplb) и обнажившимся м-коллагеном (рис. 4.6). Примечательно, что генетические недостатки vWF (болезнь фон Виллебранда, см. главу 14) или Gplb (синдром Бернара-Сулье) приводят к нарушениям свертываемости крови, что свидетельствует о важности этих факторов.

Рис. 4.6. Адгезия и агрегация тромбоцитов. Фактор Виллебранда действует как мост, соединяющий субэндотелиальный коллаген и рецептор мембран тромбоцита — гликопротеид lb (6рIb). Агрегация тромбоцитов достигается посредством связывания фибриногена с рецепторами мембран тромбоцитов — гликопротеидом Gpllb-llla (интегрин) с другими тромбоцитами. При врожденных дефектах различных рецепторов или молекул адгезии развиваются болезни, заключенные в цветных рамках. АДФ — аденозиндифосфат

Этап 2. Тромбоциты быстро меняют форму после адгезии, превращаясь из гладких дисков в острых «морских ежей» со значительно увеличенной площадью поверхности. Это изменение сопровождается изменениями в гликопротеине IIIb/IIа, которые увеличивают его сродство к фибриногену, и перемещением отрицательно заряженных фосфолипидов (особенно фосфатидилсерина) на поверхность тромбоцитов. Эти фосфолипиды связывают кальций и служат центрами нуклеации для сборки комплексов факторов свертывания крови.

Этап 3. Секреция (реакция высвобождения) содержимого гранул происходит вместе с изменениями формы; эти два события часто называют активацией тромбоцитов. Активация тромбоцитов запускается рядом факторов, включая:

• фактор свертывания крови;
• тромбин;
• АДФ.

Тромбин активирует тромбоциты с помощью специального типа рецептора, связанного с G-белком, называемым PAR, который включается протеолитическим расщеплением, осуществляемым тромбином. АДФ является компонентом плотных гранул. Таким образом, активация тромбоцитов и высвобождение АДФ порождают дополнительные возможности активации тромбоцитов — явление, называемое рекрутингом.

Активированные тромбоциты также продуцируют простагландин тромбоксан А₂ (T_XA₂) — мощный индуктор агрегации тромбоцитов. Ацетилсалициловая кислота (Аспирин) ингибирует агрегацию тромбоцитов и вызывает легкий дефект кровотечения, ингибируя циклооксигеназу, фермент тромбоцитов, который необходим для синтеза Т_XA₂. Хотя это явление менее хорошо охарактеризовано, также предполагается, что факторы роста, высвобождаемые из тромбоцитов, способствуют восстановлению стенки сосуда после травмы.

Этап 4. Агрегация тромбоцитов следует за их активацией. Конформационные изменения в гликопротеине Ilb/IIIa, которые происходят при активации тромбоцитов, позволяют связывать фибриноген, большой двухвалентный плазменный полипептид, который образует мостики между соседними тромбоцитами, что приводит к их агрегации. Как и следовало ожидать, наследственный дефицит GpIIb-IIIa приводит к нарушению свертываемости крови под названием «тромбастения Гланцмана».

Начальная волна агрегации обратима, но одновременная активация тромбина стабилизирует пробку тромбоцитов, вызывая дальнейшую активацию и агрегацию тромбоцитов и способствуя необратимому сокращению тромбоцитов. Сокращение тромбоцитов зависит от цитоскелета и консолидирует агрегированные тромбоциты. Параллельно тромбин также превращает фибриноген в нерастворимый фибрин, цементируя тромбоциты на месте и создавая окончательную вторичную гемостатическую пробку. Захваченные эритроциты и лейкоциты также обнаруживаются в гемостатических пробках, частично из-за прилипания лейкоцитов к Р-селектину, экспрессируемому на активированных тромбоцитах.

Заключение

• При повреждении эндотелия обнажается внеклеточный матрикс (ЕСМ) субэндотелиального слоя базальной мембраны; тромбоциты прилипают к ЕСМ, прежде всего, через связывание рецепторов Gplb тромбоцитов с vWF.
• Адгезия приводит к активации тромбоцитов — событию, связанному с секрецией содержимого гранул тромбоцитов, включая кальций (кофактор для нескольких белков коагуляции) и АДФ (медиатор дальнейшей активации тромбоцитов); кардинальными изменениями формы и состава мембран и активацией рецепторов Gpllb/llla.
• Рецепторы Gpllb/llla на активированных тромбоцитах образуют мостиковые сшивки с фибриногеном, что приводит к агрегации тромбоцитов.
• Сопутствующая активация тромбина способствует отложению фибрина и уплотнению тромба в месте образования.